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使用分光光度計檢測中影響標準曲線質量的幾個因素!

溶液濃度變化

溶質隨溶液濃度變化而出現電離、解離或聚合的程度,或與顯色劑生成有色物的配位數發生改變,會使光度法測定不符合比耳定律。


單色光純度不夠

光度法中要求在*大吸收峰處測定吸光度,因此要求光度計的有效譜帶寬度越窄越好,有利於獲得純度高的單色光。當單色光純度不夠,即有效譜帶寬度不夠窄時,測定的吸光度偏低,濃度越高,測得的吸光度偏低越多,致使標準曲線上端向下彎曲。

比色皿的厚度或光學性能不一致

如果裝試劑空白液的比色皿較其它比色皿薄或對光的吸收和反射少一些,則曲線的延線與縱坐標相交;反之,與橫坐標相交。因為各測點i:=Ai-A0,當裝空白液的比色皿較薄時,A0值偏低,Yi=Ai-A0值偏高,反之,Yi值偏低。


顯色反應和反應條件的問題

當顯色反應的靈敏度不高時,被測物低於某一濃度就不能顯色,當濃度不同時,溶液對光的吸收、散射的程度不同,低濃度段往往彎曲,加上濃度高時部分膠體顆粒的聚沉,致使測定的吸光度降低,曲線上端向下彎曲。


操作上的原幹擾物質的影響

例如褪色反應,顯色溶液的顏色不穩定,易褪色,若比色時間超過了穩定時間,標準係列中高濃度溶液顏色減褪,致使曲線上端向下彎曲。因此應控製好顯色劑的加入時間,可以每加3份,停3~3min,再加上3份,依次進行,以使每支比色管的顯色時間相近。


 

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